(주)루젠에스씨아이 LugenSci

Lugen SCI

Lugen R&D Service

Lentivirus Packaging Service

서비스 개요

(주)루젠에스씨아이만의 고유 형질전환 기술을 이용한 렌티바이러스 생산 시스템입니다. 렌티바이러스 벡터는 다양한 분열 세포뿐만 아니라 분열하지 않는 세포에도 유전자를 영구적으로 도입할 수 있는 형질전환 시스템으로 현재 형질전환 응용분야에서 가장 많이 이용되는 기법입니다.

렌티바이러스 벡터 디자인 및 클로닝에 어려움을 겪고 있는 연구자, 낮은 역가의 렌티바이러스 생산으로 고민 중인 연구자, 그리고 렌티바이러스 생산 및 시설구비에 시간적 경제적 어려움을 겪고 있는 연구자분들에게 본 서비스를 추천 드립니다.

서비스 종류

cDNA 발현 렌티바이러스
Knock-down (KD) 렌티바이러스
Knock-out (KO, CRISPR/Cas9) 렌티바이러스
miRNA 발현 렌티바이러스
Dox 유도발현 (TetO inducible system) 렌티바이러스

특징 및 장점

Lentiviral transfer vector 클로닝부터 바이러스 생산까지 (Lentiviral transfer vector 무상제공, cDNA 클론 구입비 또는 유전자 합성비 별도)
다양한 Cancer cell과 Primary cell에서 안정적으로 cDNA (KI), shRNA (KD), gRNA (KO), miRNA 발현유도
2 & 3 Generation VSV-G pseudo-envelop type lentivirus packaging 모두 가능
다양한 Promoter, Reporter gene 그리고 Antibiotic resistant gene 선택가능
High-titer 보장 (1 x 10^8 ~ 10^9 IFU/ml)
해외 OEM 생산이 아닌 국내 렌티바이러스 생산시스템: LMO 수입신고 절차가 필요없음
High stability lentivirus: 자사 제품인 Lenti-Con™ Reagent와 HIV-Safe™ Manager를 제품 제작에 활용하여 타사제품 대비 높은 안정성 보장

서비스 진행 과정

서비스 진행과정 이미지

가격 및 소요기간

Service Type	Titer[RT-qPCR]	Volume	Price (원)	소요기간
Pilot scale	> 1 x 10^8 IFU/ml	0.25 ml	400,000	2 ~ 3주
Medium scale	> 1 x 10^8 IFU/ml > 1 x 10^9 IFU/ml	1.0 ml 0.1 ml	1,000,000	2 ~ 3주
Large scale	> 1 x 10^8 IFU/ml > 1 x 10^9 IFU/ml	10 ml 1.0 ml	견적문의	2 ~ 3주
Vector cloning (< 2 kb)	Lentiviral vector 무상제공		견적문의	+ 2주

* 모든 렌티바이러스 제품군에는 고객의 제품사용 편의를 위해 transduction enhancer인 Lenti-TD MAX가 무상제공 됩니다.

* 벡터클로닝부터 바이러스 제작까지 all-in-one 서비스 이용 시 최종 바이러스 제품 외에 제작된 Lenti-viral transfer vector와 전체서열이 포함된 sequence map 파일이 동시 제공됩니다.

Lentivector Cloning 선택옵션 (견적요청 시 해당사항을 요청해 주세요)

Two promoter system

* Promoter 1 : CMV, MSCV, EF1a, PGK 중 선택가능

* Promoter 2 : EF1a, PGK 중 선택가능 (Promoter 1과 2에 동일한 promoter 선택불가)

* Your Gene : Genebank Accession Number or cDNA sequence

* Reporter Gene : GFP, RFP, PuroR, BleoR, BSDR 중 선택가능

One promter 2A system

* Promoter 1 : CMV, MSCV, EF1a, PGK 중 선택가능

* Your Gene 1 & 2 : Genebank Accession Number or cDNA sequence

* Reporter Gene : GFP, RFP, PuroR, BleoR, BSDR 중 선택가능

One promoter IRES system

* Promoter 1 : CMV, MSCV, EF1a, PGK 중 선택가능

* Your Gene 1 & 2 : Genebank Accession Number or cDNA sequence

* Reporter Gene : GFP, RFP, PuroR, BleoR, BSDR 중 선택가능

shRNA Expression system

* Promoter : U6 promoter 기본 사용

* Your shRNA : 유저 보유 shRNA 서열이나 서열을 모를 경우 Target Gene의 Genebank Accession Number를 제공하면 shRNA 디자인 가능

* Reporter Gene : GFP, PuroR 중 선택가능

gRNA Expression system (CRISPR/Cas9)

* Promoter : U6 promoter 기본 사용

* Your gRNA : 유저 보유 gRNA 서열이나 서열을 모를 경우 Target Gene의 Genebank Accession Number를 제공하면 gRNA 디자인 가능

* Reporter Gene : PuroR 만 가능

miRNA Expression system

* Promoter : CMV promoter 기본 사용

* Your shRNA : miRNA 이름을 알려주시면 pre-miRNA 서열이 포함된 450 ~ 500 bp genomic sequence를 합성하여 클로닝 함.

* Reporter Gene : GFP, PuroR 중 선택가능

TetO Inducible Expression system

* Promoter : TetO promoter 기본 사용

* Your Gene1 : Genebank Accession Number or cDNA sequence

* Your Gene2 : Another your 2nd gene or reporter gene (GFP, RFP, CFP, YFP 중 택 1)

Promoter 선택가이드

Promoter	Expression level	Application
CMV	High	In most cell lines
MSCV	High	Hematopoietic and stem cells
EF1a	Medium	Most cell types including primary cells and stem cells
PGK	Medium	Most cell types including primary cells and stem cells
U6	High	shRNA specific expression

제품의 QC

바이러스 농도측정: RT-qPCR titration

바이러스 역가보증 예외인 경우

렌티바이러스 벡터로 도입된 insert 길이가 4 kb 이상인 경우
Insert 유전자가 바이러스 packaging에 영향을 주는 유전자인 경우
바이러스 packaging 세포에 insert 유전자가 독성을 유발하는 경우
Secondary structure 유발서열 및 그 외 알려지지 않은 메커니즘에 의해 바이러스 packaging에 부정적인 영향을 유발하는 서열인 경우
고객 제공 plasmid 내 바이러스 packaging 관련 주요인자가 결여된 경우
검증된 envelop 이외에 고객 제공 다른 pseudo-envelop type 렌티바이러스 생산을 시도하는 경우